液液萃取 (LLE) 是高效液相色谱 (HPLC) 中广泛使用的样品制备技术，用于从复杂基质中分离和纯化目标分析物。在本文中，我们将探讨优化 LLE 以提高 HPLC 分析中分析物回收率的策略。

1. 优化萃取溶剂

萃取溶剂的选择对于实现高回收率至关重要。根据目标分析物的极性和 LogP 值选择对目标分析物具有良好亲和力的溶剂：

• 对于非极性分析物，选择非极性溶剂，如己烷或二氯甲烷。

• 对于极性分析物，使用极性更强的溶剂，如乙酸乙酯或丁醇。

• 避免使用水溶性溶剂，如甲醇或乙腈，因为它们很难与水层分离。

2.控制 pH

调整水样的 pH 值，使可电离分析物的中性形式******化：

• 对于酸性分析物，将样品酸化至低于 pKa 2 个 pH 单位。

• 对于碱性分析物，将样品碱性化至高于 pKa 2 个 pH 单位。

这可确保分析物有效地分配到有机萃取溶剂中。

3.优化溶剂比

使用高比例的萃取溶剂与样品，例如 7:1。这有助于推动平衡向有机相发展并提高回收率。确切的比例取决于分析物分配系数。

4.进行反萃取

初次萃取后，通过将 pH 值调整到相反的极端，可以将分析物反萃取到新鲜的水相中。这可以消除中性基质干扰并提高选择性。

5.优化萃取时间和混合

确保分析物有足够的时间分配到萃取溶剂中。剧烈摇晃或混合以促进相间的质量转移。离心有助于打破乳状液。

6.使用盐来增强萃取

向水性样品中添加氯化钠等盐（盐析）可以降低极性分析物的溶解度，使其进入有机相，从而实现更好的回收。

7.自动化流程

使用自动化液液萃取系统可以提高重现性和回收率，同时减少溶剂使用和劳动力。

通过优化这些关键参数，液液萃取可以成为一种稳健有效的 HPLC 样品制备技术，提供具有高分析物回收率的纯净提取物。